Kundengebundene menschliche ELISA Ausrüstung sehr empfindliches 20ng/L - Standardstrecke TPI1 der kurven-3500ng/L

Kundengebundenes menschliches TPI1 Enzym-verband die Immunosorbent-Proben-Ausrüstung, die mit Soem-Service sehr empfindlich ist

Cat.No E6795Hu

Reagens-Vorbereitung

Alle Reagenzien sollten zur Raumtemperatur vor Gebrauch geholt werden.

Standard stellen das 120μl des Standards wieder her (4000ng/L) mit 120μl des Standardverdünnungsmittels, zum einer Lösung der Standardaktie zu erzeugen 2000ng/L. Lassen Sie den Standard für 15 Minuten mit leichter Bewegung vor der Herstellung von Verdünnungen sitzen. Bereiten Sie doppelte Standardpunkte vor, indem Sie serienmäßig die Standardaktielösung verdünnen (2000ng/L) 1:2 mit dem Standardverdünnungsmittel, zum von Lösungen 1000ng/L, 500ng/L, 250ng/L und 125ng/L zu produzieren. Standardverdünnungsmittel dient als der nullstandard (0 ng/L). Jede restliche Lösung sollte an -20°C eingefroren werden und innerhalb eines Monats benutzt werden. Verdünnung vorgeschlagenen von den Standardlösungen sind, wie folgt:

Wäsche-Puffer verdünntes 20ml vom Wäsche-Puffer-Konzentrat 25x in entionisiert oder destilliertes Wasser, um 500 ml des Puffers der Wäsche-zu erbringen 1x. Wenn Kristalle sich im Konzentrat gebildet haben, Mischung leicht, bis die Kristalle vollständig sich aufgelöst haben.

Größe: 96 Brunnen

Lagerung: Speichern Sie die Reagenzien an 2-8°C. für 6-monatige übermäßiglagerung sich beziehen das auf Verfallsdatum halten sie an -20°C. Avoid wiederholten Tauwetterzyklen. Wenn einzelne Reagenzien geöffnet sind, wird es empfohlen, dass die Ausrüstung innerhalb 1-monatigen benutzt wird.

*This Produkt ist für nur Forschungsgebrauch, nicht für Gebrauch in den Diagnosenverfahren. Es ist sich empfiehlt in hohem Grade, diese Anweisung völlig vor Gebrauch zu lesen.

Präzision

Intra-Proben-Präzision (Präzision innerhalb einer Probe) drei Proben bekannte Konzentration wurde auf einer Platte geprüft, um Intra-probenpräzision festzusetzen.

Inter-Proben-Präzision (Präzision zwischen Proben) drei Proben bekannte Konzentration wurde in den unterschiedlichen Proben geprüft, um Interprobenpräzision festzusetzen.

Lebenslauf (%) = SD/mean x 100

Intra-Probe: Lebenslauf<8>

Inter-Probe: Lebenslauf<10>

Beabsichtigter Gebrauch

Diese Sandwichausrüstung ist für die genaue quantitative Entdeckung von Mensch Triosephosphate-Isomerase (alias TPI1) im Serum, Plasma, Zellkulturobenschwimmung, Zellen-lysates, Gewebehomogenate.

Proben-Prinzip

Diese elisa Testausrüstung ist eine Enzym-verbundene Immunosorbent-Probe (ELISA). Die Platte ist mit menschlichem Antikörper TPI1 vorgalvanisiert worden. TPI1 stellen sich in der Probe wird hinzugefügt und bindet an die Antikörper dar, die auf den Brunnen beschichtet werden. Und dann biotinylated menschlicher Antikörper TPI1 wird addiert und bindet an TPI1 in der Probe. Dann wird Streptavidin-HRP addiert und bindet an den Antikörper Biotinylated TPI1. Nach Ausbrütung wird befreites Streptavidin-HRP weg während eines waschenden Schrittes gewaschen. Substratlösung wird dann addiert und Farbe entwickelt sich im Verhältnis zu der Menge menschlichen TPI1. Die Reaktion wird durch Zusatz von säurehaltigem stoppen Lösung beendet und Absorption wird bei 450 Nanometer gemessen.

Probierverfahren

1. Bereiten Sie alle Reagenzien vor, Standardlösungen und Proben, wie angewiesen. Holen Sie alle Reagenzien zur Raumtemperatur vor Gebrauch. Die Probe wird bei Zimmertemperatur durchgeführt.

2. Bestimmen Sie die Anzahl von den Streifen, die für die Probe erfordert werden. Fügen Sie die Streifen in die Rahmen für Gebrauch ein. Die unbenutzten Streifen sollten an 2-8°C. gespeichert werden.

3. Fügen Sie Standard 50μl Standard gut hinzu. Anmerkung: Fügen Sie Antikörper nicht Standard gut hinzu, weil die Standardlösung biotinylated Antikörper enthält.

4. Fügen Sie Probe 40μl Beispielbrunnen hinzu und dann fügen Sie Antikörper 10μl anti-TPI1 Beispielbrunnen hinzu, dann fügen Sie streptavidin-HRP 50μl Beispielbrunnen und Standardbrunnen hinzu (nicht Leerzeichenaufbereitungssteuerungsbrunnen). Mischen Sie gut. Bedecken Sie die Platte mit einem Eichmeister. Brüten Sie 60 Minuten an 37°C. aus.

5. Entfernen Sie den Eichmeister und waschen Sie die Platte 5mal mit Wäschepuffer. Tränken Sie Brunnen mit mindestens 0,35 ml-Wäschepuffer für 30 Sekunden bis 1 Minute für jedes Washington. Für automatisierte Reinigung saugen Sie alle Brunnen an und waschen Sie 5mal mit dem Wäschepuffer und überfüllen hervorquillt mit Wäschepuffer. Beflecken Sie die Platte auf Papierhandtücher oder anderes saugfähiges Material.

6. Fügen Sie Lösung A des Substrates 50μl jedem Brunnen hinzu und fügen Sie Lösung dann B des Substrates 50μl jedem gut hinzu. Brüten Sie die Platte aus, die mit einem neuen Eichmeister für 10 Minuten an 37°C in der Dunkelheit bedeckt wird.

7. Addieren Sie 50μl stoppen Lösung zu jedem gut, die blaue Farbe ändert in Gelb sofort.

8. Bestimmen Sie die optische Dichte (Od-Wert) von jedem Brunnen sofort unter Verwendung eines microplate Lesersatzes bis 450 Nanometer innerhalb 10 Menuetts, nachdem Sie die Endlösung addiert haben.

Berechnung des Ergebnisses

Konstruieren Sie eine Standardkurve, indem Sie das durchschnittliche Od für jedes grafisch darstellen, das auf der vertikalen (Y) Achse gegen die Konzentration auf der horizontalen (X) Achse Standard ist und zeichnen Sie eine beste Sitzkurve durch die Punkte auf dem Diagramm. Diese Berechnungen können mit computer-gestützter Kurveinstallations-Software gute Leistung gebracht werden und die beste Sitzlinie kann durch Regressionsanalyse bestimmt werden.