FETU - Eine Ausrüstung der Ratten-ELISA Empfindlichkeit 0,26 Ng/ml mit Soem-Service E0580Ra

96 WellsStrong Ausrüstung der Empfindlichkeits-und Besonderheits-Ratten-FETU-A ELISA mit Soem-Service

Cat.No E0580Ra

Größe: 96 Brunnen

Lagerung: Speichern Sie die Reagenzien an 2-8°C. für 6-monatige übermäßiglagerung sich beziehen das auf Verfallsdatum halten sie an -20°C. Avoid wiederholten Tauwetterzyklen. Wenn einzelne Reagenzien geöffnet sind, wird es empfohlen, dass die Ausrüstung innerhalb 1-monatigen benutzt wird.

*This Produkt ist für nur Forschungsgebrauch, nicht für Gebrauch in den Diagnosenverfahren. Es ist sich empfiehlt in hohem Grade, diese Anweisung völlig vor Gebrauch zu lesen.

Proben-Prinzip

Diese Ausrüstung ist eine Enzym-verbundene Immunosorbent-Probe (ELISA). Die Platte ist mit Antikörper der Ratte FETU-A vorgalvanisiert worden. FETU-A stellen sich in der Probe wird hinzugefügt und bindet an die Antikörper dar, die auf den Brunnen beschichtet werden. Und dann biotinylated Antikörper der Ratten-FETU-A wird addiert und bindet an FETU-A in der Probe. Dann wird Streptavidin-HRP addiert und bindet an das Biotinylated FETU-Aantibody. Nach Ausbrütung wird befreites Streptavidin-HRP weg während eines waschenden Schrittes gewaschen. Substratlösung wird dann addiert und Farbe entwickelt sich im Verhältnis zu der Menge der Ratte FETU-A. Die Reaktion wird durch Zusatz von säurehaltigem stoppen Lösung beendet und Absorption wird bei 450 Nanometer gemessen.

Reagens bereitgestellt

Material erfordert aber nicht geliefert

• Brutkasten 37°C±0.5°C
• Saugfähiges Papier
• Präzisionspipetten und Wegwerfpipettenspitzen
• Säubern Sie Rohre
• Entionisiert oder destilliertes Wasser
• Microplate-Leser mit 450 ± 10nm Wellenlängenfilter

Reagens-Vorbereitung

Alle Reagenzien sollten zur Raumtemperatur vor Gebrauch geholt werden.

Standard stellen das 120μl des Standards (240ng/ml) mit 120μl des Standardverdünnungsmittels wieder her, um eine Lösung der Standardaktie zu erzeugen 120ng/ml. Lassen Sie den Standard für 15 Minuten mit leichter Bewegung vor der Herstellung von Verdünnungen sitzen. Bereiten Sie doppelte Standardpunkte vor, indem Sie serienmäßig das 1:2 der Standardaktielösung (120ng/ml) mit Standardverdünnungsmittel verdünnen, um Lösungen 60ng/ml, 30ng/ml, 15ng/ml und 7.5ng/ml zu produzieren. Standardverdünnungsmittel dient als der nullstandard (0 ng/ml). Jede restliche Lösung sollte an -20°C eingefroren werden und innerhalb eines Monats benutzt werden. Verdünnung vorgeschlagenen von den Standardlösungen sind, wie folgt:

Wäsche-Puffer verdünntes 20ml vom Wäsche-Puffer-Konzentrat 30x in entionisiert oder destilliertes Wasser, um 500 ml des Puffers der Wäsche-zu erbringen 1x. Wenn Kristalle sich im Konzentrat gebildet haben, Mischung leicht, bis die Kristalle vollständig sich aufgelöst haben.

Probierverfahren

1. Bereiten Sie alle Reagenzien vor, Standardlösungen und Proben, wie angewiesen. Holen Sie alle Reagenzien zur Raumtemperatur vor Gebrauch. Die Probe wird bei Zimmertemperatur durchgeführt.

2. Bestimmen Sie die Anzahl von den Streifen, die für die Probe erfordert werden. Fügen Sie die Streifen in die Rahmen für Gebrauch ein. Die unbenutzten Streifen sollten an 2-8°C. gespeichert werden.

3. Fügen Sie Standard 50μl Standard gut hinzu. Anmerkung: Fügen Sie Antikörper nicht Standard gut hinzu, weil die Standardlösung biotinylated Antikörper enthält.

4. Fügen Sie Probe 40μl Beispielbrunnen hinzu und dann fügen Sie anti--FETU-Ein Antikörper 10μl Beispielbrunnen hinzu, dann fügen Sie streptavidin-HRP 50μl Beispielbrunnen und Standardbrunnen hinzu (nicht Leerzeichenaufbereitungssteuerungsbrunnen). Mischen Sie gut. Bedecken Sie die Platte mit einem Eichmeister. Brüten Sie 60 Minuten an 37°C. aus.

5. Entfernen Sie den Eichmeister und waschen Sie die Platte 5mal mit Wäschepuffer. Tränken Sie Brunnen mit mindestens 0,35 ml-Wäschepuffer für 30 Sekunden bis 1 Minute für jedes Washington. Für automatisierte Reinigung saugen Sie alle Brunnen an und waschen Sie 5mal mit dem Wäschepuffer und überfüllen hervorquillt mit Wäschepuffer. Beflecken Sie die Platte auf Papierhandtücher oder anderes saugfähiges Material

6. Fügen Sie Lösung A des Substrates 50μl jedem Brunnen hinzu und fügen Sie Lösung dann B des Substrates 50μl jedem gut hinzu. Brüten Sie die Platte aus, die mit einem neuen Eichmeister für 10 Minuten an 37°C in der Dunkelheit bedeckt wird.

7. Addieren Sie 50μl stoppen Lösung zu jedem gut, die blaue Farbe ändert in Gelb sofort.

8. Bestimmen Sie die optische Dichte (Od-Wert) von jedem Brunnen sofort unter Verwendung eines microplate Lesersatzes bis 450 Nanometer innerhalb 10 Menuetts, nachdem Sie die Endlösung addiert haben.