Hohe empfindliche Ausrüstung der Ratten-ELISA für Interleukin 1 Größe des Alpha-/ILA 96 Wells

Hohe empfindliche ELISA-Ausrüstung für Ratte Interleukin 1 Alphaila 96 quillt hervor

Cat.No E0118Ra

Standardkurven-Strecke: 1ng/L - 300ng/L

Empfindlichkeit: 0.48ng/L

Größe: 96 Brunnen

Lagerung: Speichern Sie die Reagenzien an 2-8°C. für 6-monatige übermäßiglagerung sich beziehen das auf Verfallsdatum halten sie an -20°C. Avoid wiederholten Tauwetterzyklen. Wenn einzelne Reagenzien geöffnet sind, wird es empfohlen, dass die Ausrüstung innerhalb 1-monatigen benutzt wird.

* dieses Produkt ist für nur Forschungsgebrauch, nicht für Gebrauch in den Diagnosenverfahren. Es ist sich empfiehlt in hohem Grade, diese Anweisung völlig vor Gebrauch zu lesen.

Proben-Prinzip

Diese Ausrüstung ist eine Enzym-verbundene Immunosorbent-Probe (ELISA). Die Platte ist mit Antikörper der Ratte IL-1A vorgalvanisiert worden. IL-1A stellen sich in der Probe wird hinzugefügt und bindet an die Antikörper dar, die auf den Brunnen beschichtet werden. Und dann biotinylated Antikörper der Ratten-IL-1A wird addiert und bindet an IL-1A in der Probe. Dann wird Streptavidin-HRP addiert und bindet an den Antikörper Biotinylated IL-1A. Nach Ausbrütung wird befreites Streptavidin-HRP weg während eines waschenden Schrittes gewaschen. Substratlösung wird dann addiert und Farbe entwickelt sich im Verhältnis zu der Menge der Ratte IL-1A. Die Reaktion wird durch Zusatz von säurehaltigem stoppen Lösung beendet und Absorption wird bei 450 Nanometer gemessen.

Reagens bereitgestellt

Vorkehrungen

• Vor Gebrauch sollten die Ausrüstung und die Probe zur Raumtemperatur natürlich gewärmt werden 30 Minuten.
• Diese Anweisung muss in das Experiment ausschließlich befolgt werden.
• Sobald die gewünschte Anzahl von Streifen entfernt worden ist, versiegeln Sie sofort die Tasche wieder, um das Bleibung vor Verschlechterung zu schützen. Bedecken Sie alle Reagenzien, wenn nicht verwendet.
• Make sure Auftrag und Rate des Zusatzes von gut-zu-gut pipettierend, wenn Reagenzien pipettiert werden.
• Pipette kippt um und Platteneichmeister sollte sauber und Wegwerf in der Hand sein, Kreuz-Kontamination zu vermeiden.
• Vermeiden Sie, die Reagenzien von den verschiedenen Reihen zusammen zu verwenden.
• Substratlösung B ist für Licht, herausstellen nicht Substratlösung B, um für eine lange Zeit zu beleuchten empfindlich.
• Stoppen Sie Lösung enthält Säure. Tragen Sie bitte Augen-, Hand- und Hautschutz, wenn Sie dieses Material verwenden. Vermeiden Sie Kontakt der Haut oder der Schleimhäute mit Ausrüstungsreagens.
• Die Ausrüstung sollte nicht über dem Verfallsdatum hinaus benutzt werden.

Reagens-Vorbereitung

Alle Reagenzien sollten zur Raumtemperatur vor Gebrauch geholt werden.

Standard stellen das 120μl des Standards wieder her (320ng/L) mit 120μl des Standardverdünnungsmittels, zum einer Lösung der Standardaktie zu erzeugen 160ng/L. Lassen Sie den Standard für 15 Minuten mit leichter Bewegung vor der Herstellung von Verdünnungen sitzen. Bereiten Sie doppelte Standardpunkte vor, indem Sie serienmäßig die Standardaktielösung verdünnen (160ng/L) 1:2 mit dem Standardverdünnungsmittel, zum von Lösungen 80ng/L, 40ng/L, 20ng/L und 10ng/L zu produzieren. Standardverdünnungsmittel dient als der nullstandard (0 ng/L). Jede restliche Lösung sollte an -20°C eingefroren werden und innerhalb eines Monats benutzt werden. Verdünnung vorgeschlagenen von den Standardlösungen sind, wie folgt:

Wäsche-Puffer verdünntes 20ml vom Wäsche-Puffer-Konzentrat 30x in entionisiert oder destilliertes Wasser, um 500 ml des Puffers der Wäsche-zu erbringen 1x. Wenn Kristalle sich im Konzentrat gebildet haben, Mischung leicht, bis die Kristalle vollständig sich aufgelöst haben.

Zusammenfassung

1. Bereiten Sie alle Reagenzien, Proben und Standards vor.
2. Fügen Sie Probe und ELISA-Reagens in jedes gut hinzu. Brüten Sie 1 Stunde lang an 37°C. aus.

3. Waschen Sie die Platte 5mal.

4. Fügen Sie Substratlösung A und B. Incubate für 10 Minuten an 37°C. hinzu.

5. Fügen Sie stoppen Lösung hinzu und Farbe entwickelt sich.

6. Lesen Sie den Od-Wert innerhalb 10 Minuten.

Berechnung des Ergebnisses

Konstruieren Sie eine Standardkurve, indem Sie das durchschnittliche Od für jedes grafisch darstellen, das auf der vertikalen (Y) Achse gegen die Konzentration auf der horizontalen (X) Achse Standard ist und zeichnen Sie eine beste Sitzkurve durch die Punkte auf dem Diagramm. Diese Berechnungen können mit computer-gestützter Kurveinstallations-Software gute Leistung gebracht werden und die beste Sitzlinie kann durch Regressionsanalyse bestimmt werden.

Hinweise

Sahin Z., Celik-Ozenci C., Akkoyunlu G., Korgun E.T., Acar N., Erdogru T., Demir R., Ustunel I.
Fertil. Steril. 85 Ergänzungen 1:1265- 1275(2006)